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發(fā)布日期:2024/2/20 9:39:00

PERFEMIKER? AuroraGelTMPhenol Red Free) Matrix是從富含胞外基質(zhì)蛋白的小鼠腫瘤中提取出的天然基底膜基質(zhì)。主要依次為層粘連蛋白(Laminin)、IV 型膠原蛋白(Col-IV)、巢蛋白(Entactin)、硫酸乙酰肝素蛋白多糖(Heparan sulphate proteoglycans)及多種細(xì)胞因子,如類胰島素生長(zhǎng)因子(IGF- 1)、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β(TGF-β) 、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)、表皮生長(zhǎng)因子(EGF)、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)等。在室溫條件下,聚合形成具有生物學(xué)活性的三維基質(zhì),模擬體內(nèi)細(xì)胞基底膜的結(jié)構(gòu)、組成、物理特性和功能,有利于體外細(xì)胞的培養(yǎng)和分化。產(chǎn)品溶解于高糖DMEM 中,且非定制產(chǎn)品均添加了50μg/mL 慶大霉素。適用于與細(xì)胞增殖或分化相關(guān)的2D或3D培養(yǎng),也適用于細(xì)胞形態(tài)學(xué)研究。 常被應(yīng)用于腫瘤細(xì)胞的遷移或侵襲、體外血管生成、主動(dòng)脈環(huán)和細(xì)胞球培養(yǎng)等。

 

推薦應(yīng)用

細(xì)胞增殖或分化相關(guān)的二維或三維培養(yǎng),以及細(xì)胞形態(tài)的研究,相關(guān)應(yīng)用主要有:細(xì)胞的遷移或侵襲、體外血管生成、主動(dòng)脈環(huán)和細(xì)胞球培養(yǎng)等。

 

產(chǎn)品參數(shù)

 

來(lái)源:Engelbreth-Holm-Swarm murine sarcoma

外觀:

①顏色:產(chǎn)品表現(xiàn)為半透明淡黃色

②形態(tài):4℃融解后,呈液態(tài)

濃度:蛋白濃度范圍在8~13mg/mL之間

內(nèi)毒素:≤ 4.5EU/ mL

LDEV:無(wú)

凝膠時(shí)間:室溫條件下5-30min凝膠,37°C時(shí)成膠速度加快

 

產(chǎn)品質(zhì)量控制規(guī)范

? 每個(gè)批次小鼠均經(jīng)過(guò)篩選無(wú)鼠源病毒、無(wú)病原菌和支原體、無(wú)寄生蟲(chóng)和原蟲(chóng),有動(dòng)物健康報(bào)告,確保對(duì)生產(chǎn)使用的小鼠進(jìn)行嚴(yán)格控制;

? 對(duì)EHS 腫瘤進(jìn)行包括LDEV 在內(nèi)的多種病原體進(jìn)行廣泛的PCR 檢測(cè),微生物檢測(cè)、內(nèi)毒素檢測(cè),確保對(duì)生產(chǎn)過(guò)程中使用的原材料進(jìn)行嚴(yán)格控制;

? 使用PCR 技術(shù)擴(kuò)增產(chǎn)品中支原體和LDEV 病毒序列,結(jié)果為陰性;

? 使用BCA 方法測(cè)定蛋白濃度;

? 使用凝膠限度檢查法檢測(cè)產(chǎn)品內(nèi)毒素水平;

? 使用直接接種法檢測(cè)產(chǎn)品微生物,結(jié)果為無(wú)真菌和細(xì)菌檢出;

? 使用SDS-PAGE 法檢測(cè)產(chǎn)品,電泳結(jié)果為目的條帶與參照品一致;

? 能快速成膠,在37℃溫度下能穩(wěn)定保持14 天;

? 每批次產(chǎn)品均通過(guò)細(xì)胞3D 培養(yǎng)和細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)。

 

運(yùn)輸與保存方法

干冰運(yùn)輸。-20℃凍存(不要放在無(wú)霜冰箱內(nèi)),有效期兩年。

 

*操作注意事項(xiàng)

1. PERFEMIKER? AuroraGelTM系列基質(zhì)膠的融化與保存

注意:PERFEMIKER? AuroraGelTM系列基質(zhì)膠對(duì)溫度非常敏感,千萬(wàn)不可多次重復(fù)凍融。PERFEMIKER? AuroraGelTM系列基質(zhì)膠的分裝以及凝膠前的準(zhǔn)備過(guò)程中都必須在冰上(4℃)操作,因?yàn)闇囟壬晕⑻岣撸己芸赡艹霈F(xiàn)成膠現(xiàn)象,從而導(dǎo)致基質(zhì)膠不均勻或者影響后續(xù)的凝膠。用來(lái)盛放的試管或者分裝的槍頭都必須進(jìn)行預(yù)冷。

1)收到產(chǎn)品后,如果暫時(shí)不使用,請(qǐng)整瓶直接放到-20℃凍存(不要放在無(wú)霜冰箱內(nèi))。

2)第一次使用,將整瓶PERFEMIKER? AuroraGelTM系列基質(zhì)膠包埋到碎冰中再放到4℃冰箱中,等待其充分融解。

3)產(chǎn)品在每次由冷凍狀態(tài)變?yōu)槿诮鉅顟B(tài)時(shí),請(qǐng)適當(dāng)搖晃或使用移液器吹吸,確保體系內(nèi)部蛋白分布均勻。

 

2.PERFEMIKER? AuroraGelTM系列基質(zhì)膠的使用特別注意

1)基質(zhì)膠在22-35℃能夠快速成膠??捎脽o(wú)血清培養(yǎng)基來(lái)稀釋PERFEMIKER? AuroraGelTM系列基質(zhì)膠,稀釋后需要立即使用。

2) PERFEMIKER? AuroraGelTM系列基質(zhì)膠均為無(wú)菌產(chǎn)品,產(chǎn)品的分裝、使用等操作需在無(wú)菌環(huán)境下進(jìn)行,與產(chǎn)品接觸的實(shí)驗(yàn)器材(如:槍頭、凍存管等)使用前需預(yù)冷(提前降溫)。

3)請(qǐng)您在使用過(guò)程中不要過(guò)長(zhǎng)時(shí)間地用手握住裝有本產(chǎn)品的容具,防止體溫使產(chǎn)品凝結(jié);若在較短時(shí)間內(nèi)造成產(chǎn)品較為厚重粘稠,您可以將本產(chǎn)品重新置于0℃ - 4℃的環(huán)境內(nèi)1-2 h 使其恢復(fù)流動(dòng)性,不影響使用。

4)本產(chǎn)品僅供科研使用,禁止用于人體。

 

3.避免污染

實(shí)驗(yàn)操作人員需嚴(yán)格區(qū)分實(shí)驗(yàn)操作臺(tái)、清潔區(qū)和污染區(qū),確保插取吸頭、加樣、丟棄吸頭的動(dòng)作呈單向流動(dòng)。為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

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